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                關(guān)于本生2.0ml凍存管的使用,你知道多少?

                更新時(shí)間:2022-10-26    點(diǎn)擊次數(shù):655

                     本生2.0ml凍存管能耐受-196℃低溫的聚丙烯制成,有硅膠環(huán)以保證密封,所有可立凍存管底部經(jīng)特殊設(shè)計(jì),可固定在凍存架或托盤上供單手操作,無菌,無熱源認(rèn)證。


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                  2.0ml凍存管樣品的制備:
                  1、培養(yǎng)細(xì)胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
                  (1)在合適的鹽濃度下,應(yīng)保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復(fù)性。
                  (2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物和共價(jià)鍵二硫鍵,使其形成一個(gè)各自多肽的溶液。
                  (3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
                  (4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應(yīng)在低溫下進(jìn)行,以避免細(xì)胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
                  (5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,但要注意不要反復(fù)凍融。
                  2、組織樣品的制備:
                  手術(shù)切除的組織塊迅速置于預(yù)冷的0.95生理鹽水中,漂洗數(shù)次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個(gè)較小的組織塊放入機(jī)戒組織勻漿器中,按組織凈重,加入相應(yīng)體積的裂解液進(jìn)行勻漿,離心收集上清加入Laemmli樣品緩沖液強(qiáng)力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準(zhǔn)備就緒。

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