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                輔酶F420(F420)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

                簡(jiǎn)要描述:輔酶F420(F420)酶聯(lián)免疫分析試劑盒本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

                • 產(chǎn)品型號(hào):BS-4855
                • 產(chǎn)       地:天津市
                • 更新時(shí)間:2024-03-04
                • 訪  問  量:1125
                詳細(xì)介紹
                品牌其他品牌產(chǎn)地國(guó)產(chǎn)
                級(jí)別其他規(guī)格48T/96T

                  輔酶F420(F420)酶聯(lián)免疫分析試劑盒  BS-4855


                  本試劑盒僅供研究使用。

                  檢測(cè)范圍:

                  96T

                  1.2 ng/L -50ng/L

                  使用目的:

                  本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中輔酶 F420(F420)含量。

                  實(shí)驗(yàn)原理

                  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中輔酶 F420(F420)水平。用純化的輔酶 F420 (F420)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入輔酶 F420(F420), 再與 HRP 標(biāo)記的輔酶 F420(F420)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成 終的黃色。顏色的深淺和樣品中的輔酶 F420(F420)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下 測(cè)定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中輔酶 F420(F420)濃度。

                  試劑盒組成

                  1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶

                  3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶

                  5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶

                  7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

                  9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份

                  11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個(gè)

                  標(biāo)本要求

                  1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能 馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

                  2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 yizhi辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

                  操作步驟

                  1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀 釋。

                  40ng/L

                  5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

                  150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

                  20ng/L

                  4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

                  150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

                  10ng/L

                  3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

                  150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

                  5ng/L

                  2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

                  150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

                  2.5ng/L

                  1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

                  150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

                  2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、 待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μ 然后再加待測(cè)樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

                  3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

                  4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

                  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。

                  6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

                  7. 溫育:操作同 3。

                  8. 洗滌:操作同 5。

                  9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

                  10 分鐘.

                  10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

                  11. 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

                  操作程序總結(jié):

                  輔酶F420(F420)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 計(jì)算

                  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的 OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo) 準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù) 即為樣品的實(shí)際濃度。

                  注意事項(xiàng)

                  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未 用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

                  2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

                  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好 控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

                  4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值 大于標(biāo)準(zhǔn)品孔siyi孔的 OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì) 算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

                  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

                  6.底物請(qǐng)避光保存。

                  7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

                  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

                  9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

                  保存條件及有效期

                  1.試劑盒保存:;2-8℃。

                  2.有效期:6 個(gè)月

                 


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